HPLC測定已知雜質時，可以按照以下步驟進行計算：

1. 確定雜質含量。根據色譜圖和對照品溶液的濃度，可以確定雜質的含量。
2. 計算峰面積。測量供試品溶液色譜圖上各雜質的峰面積，并乘以相應的校正因子后與對照溶液主成分的峰面積比較。
3. 計算雜質含量。將測量得到的峰面積與對照溶液主成分的峰面積進行比較，可以計算出各雜質的含量。

需要注意的是，HPLC測定雜質時，需要使用對照品溶液進行對比和校正。因此，在配制對照品溶液時，需要保證其濃度準確可靠，并且與供試品溶液的進樣量相同。同時，在計算峰面積時，也需要根據實際情況選擇合適的校正因子，以保證結果的準確性。